Oznaczenie ilościowe DNA wirusa Epsteina-Barra w osoczu u pacjentów z zaawansowanym rakiem nosogardzieli ad 6

Tylko 10 z 99 pacjentów miało wykrywalne stężenie DNA EBV w swoim osoczu w tym czasie (mediana, 121 kopii na mililitr, zakres od 8 do 5066). Siedmiu z tych 10 pacjentów miało później nawrót: 6 miało tylko odległe przerzuty, a miało odległe przerzuty i nawrót w szyi. Nie było związku między stężeniem DNA EBV tydzień po zakończeniu radioterapii a ryzykiem nawrotu u tych 10 pacjentów. Łącznie 130 próbek krwi uzyskano od 68 pacjentów, którzy byli w ciągłej remisji w okresie obserwacji (Figura 1G). Najwyższą wartość DNA osoczowego EBV wybrano w przypadku pacjentów, którzy mieli więcej niż jeden pomiar podczas okresu obserwacji. Mediana stężenia DNA EBV w osoczu w tych 130 próbkach wynosiła 0 kopii na mililitr (zakres międzykwartylowy, 0 do 0). Różnica w stężeniach DNA EBV podczas okresu obserwacji pomiędzy pacjentami, u których wystąpił nawrót, a tymi, którzy nie wystąpili, była istotna (p <0,001) (ryc. 1E). Kiedy ocenialiśmy czas pobierania krwi (rysunek 1H), stwierdziliśmy, że stężenia DNA EBV w próbkach otrzymanych tydzień po zakończeniu radioterapii były najlepszymi predykatorami prawdopodobieństwa nawrotu (P <0,001).
Wpisywanie DNA EBV z Plasma and Primary Tumour
Rysunek 2. Rysunek 2. Wyniki genotypowania EBV. Panel A pokazuje wyniki elektroforezy w żelu agarozowym produktów jakościowego testu PCR. Genotyp genu LMP-1 był identyczny w parach próbek osocza i guza od 11 pacjentów; pokazywane są próbki od 3 (ścieżki od 4 do 9). Ścieżka pokazuje marker DNA o 100 pz, ścieżkę 2, kontrolę ujemną (woda) i ścieżkę 3, kontrolę pozytywną (linię komórkową Namalwa EBV-pozytywną). Panel B pokazuje sekwencje genu LMP-1 w sparowanych próbkach DNA od trzech pacjentów. Startery wybrane do tego badania wytworzyły fragment 131-bp lub 161-bp, w zależności od obecności lub braku delecji 30-bp na C-końcu genu LMP-1.
W elektroforezie żelowej, jakościowy PCR wykazał, że rozmiary produktów PCR dla LMP-1 (Figura 2A) i EBNA-3C były identyczne w parach próbek pierwotnego guza i osocza. Bezpośrednie sekwencjonowanie produktów PCR wykazało całkowitą homologię EBNA-3C u wszystkich 11 pacjentów, dla których dostępne były próbki, oraz LMP-1 dla 7 z 11 pacjentów (Figura 2B). Pozostali czterej pacjenci mieli różnicę tylko jednej bazy między próbkami.
Przeżycie
Rycina 3. Rycina 3. Szacunki Kaplan-Meier całkowitego przeżycia wolnego od nawrotów, zgodnie z stężeniem DNA EBV w osoczu lub na etapie klinicznym. Panele A i B pokazują całkowite przeżycie i przeżycie bez nawrotów, odpowiednio, zgodnie z stężeniem DNA EBV w surowicy przed leczeniem. Panele C i D pokazują, odpowiednio, całkowite przeżycie i czas przeżycia bez nawrotów, zgodnie z poziomem DNA EBV w osoczu, tydzień po zakończeniu radioterapii. Panele E i F pokazują, odpowiednio, całkowite przeżycie i czas przeżycia bez nawrotów, zgodnie z klinicznym stadium. Do obliczenia wartości P użyto testu log-rank.
Szacunki Kaplana-Meiera wykazały, że stężenia EBV DNA przed leczeniem oraz obecność lub brak DNA EBV w osoczu po radioterapii korelowały znacząco z całkowitym przeżyciem bez nawrotów (Ryc. 3)
[przypisy: alprazolam, wdrożenia magento, nutrend ]
[więcej w: wyszukiwarka kodów icd 10, za krotkie wedzidelko, za mało neutrocytów ]